2024-09-05
تحديد كحول السكر في المواد الغذائية عن طريق تصوير الكروماتوجرافية السائلة عالية الأداء
1الطريقة والمبدأ
يتم تحديدها بواسطة تصوير الكروماتوجرافية السائلة عالية الأداء بواسطة كاشف RID ويتم تحديدها بطرق قياسية خارجية.
2تشكيل الأدوات وأساليب التجارب
2.1 تشكيل الأدوات
لا، لا، لا | تكوينات النظام | كمية |
1 | P3210B مضخة منحدر ضغط عالي ثنائية | 1 |
2 | CT3210 فرن العمود | 1 |
3 | AS3210 جهاز أخذ العينات | 1 |
4 | كاشف RI | 1 |
5 | 4.6*250mm 5μm عمود أمينو | 1 |
6 | محطة عمل SmartLab | 1 |
الجدول 1 قائمة التكوينات
2.2 الطريقة التجريبية
2.2.1 إعداد المفاعلات والمعايير
لا، لا، لا | المفاعلات | النقاء |
1 | أسيتونيتريل | نقية من الناحية الكروماتوغرافية |
2 | 4 أنواع من معايير مزيج المحليات | 40 غرام/لتر |
الجدول 2 قائمة المفاعلات والمعايير
المنحنى القياسي: تم تخفيف المعيار المختلط (40 mg/mL) من المحليات الأربعة بالماء إلى تركيز 1.6 mg/mL، 2.4 mg/mL، 3.2 mg/mL، 4.0 mg/mL، 4.8 mg/mL.سلسلة منحنيات عمل التركيز 0 mg/mL.
2.22 ظروف التلوين
عمود الكروماتوجرافيا | عمود أمينو، 4.6 * 250mm، 5μm | ||
المرحلة المتنقلة | الأسيتونيتريل: الماء=80:20 | ||
معدل التدفق | 1 مل/دقيقة | ||
الحرارة | 30 درجة مئوية | درجة حرارة الخلية | 40 درجة مئوية |
حجم الحقن | 20 ميكرو لتر |
الجدول 3 ظروف التلوين
2.2.3 المعالجة المسبقة للعينة
يجب أن تكون عينات المشروبات غير البروتينية لا تقل عن 200 مل ووضعها في وعاء محاط بالهواء بعد خلطها بالكامل. 10 غرام من العينة في قارورة حجميّة 50 مل.وتثبيت الحجم إلى 50 مل مع الماءويتم هزها جيدا ويتم الكشف عنها على آلة بعد مرورها عبر غشاء تصفية 0.22μm.
3نتائج التجربة
3.1 ملاءمة النظام
الشكل 1 كروماتوجرام من 6.0mg/mLمعيار خلط المحلي
ملاحظات:كما يظهر الشكل، هناك قمم جيدة لـ erythritol و xylitol و sorbitol و maltitol ، وليس هناك قمم أخرى حول قمم الهدف ، والتي تلبي المتطلبات التجريبية.
3.2 الخطية
الشكل 2 المنحنى القياسي للإريتريتول
الشكل 3 المنحنى القياسي للزيليتول
الشكل 4 المنحنى القياسي للسوربتول
الشكل 5 المنحنى القياسي للمالتوز
تركيزات منحنيات اختلاط المعايير للأدوات الحلوة الأربعة هي 1.6 mg/mL، 2.4 mg/mL، 3.2 mg/mL، 4.0 mg/mL، 4.8 mg/mL و 6.0 mg/mL. كما يظهر الشكل،معدل الارتباط الخطي للمحاور القياسية لأربعة مُحليات أعلى من 0.999، والتي استوفت متطلبات التجربة.
3.3 قابلية التكرار
الشكل 6 كروماتوجرام التكرار لـ 6 حقن من 3.2mg/mL معايير خلط المحليات
مدة الاحتفاظ |
لا، لا، لا |
إريتريتول |
الزيليتول |
السوربيتول |
مالتيتول |
1 |
8.407 |
11.365 |
15.637 |
36.644 |
|
2 |
8.414 |
11.374 |
15.638 |
36.658 |
|
3 |
8.415 |
11.377 |
15.644 |
36.645 |
|
4 |
8.412 |
11.374 |
15.638 |
36.635 |
|
5 |
8.426 |
11.391 |
15.670 |
36.696 |
|
6 |
8.436 |
11.405 |
15.680 |
36.701 |
|
RSD ((%) |
0.128 |
0.128 |
0.120 |
0.077 |
الجدول 4 6 حقن إمكانية تكرار وقت الاحتفاظ
منطقة القمة |
لا، لا، لا | إريتريتول | الزيليتول | السوربيتول | مالتيتول |
1 | 228.976 | 239.243 | 234.601 | 224.837 | |
2 | 230.029 | 238.083 | 239.130 | 224.900 | |
3 | 224.656 | 237.784 | 236.914 | 222.373 | |
4 | 227.415 | 239.595 | 238.192 | 222.414 | |
5 | 227.455 | 240.591 | 238.963 | 223.679 | |
6 | 228.492 | 239.876 | 237.412 | 227.865 | |
RSD ((%) | 0.809 | 0.450 | 0.705 | 0.913 |
الجدول 5 6 إدخال ذروة إمكانية تكرار المنطقة
ملاحظة: كما يظهر الجدول ، فإن وقت الاحتفاظ RSD للإريتريتول ، الزيليتول ، السوربيتول و مالتيتول هو 0. 128 ٪ ، 0. 128 ٪ ، 0. 120 ٪ ، 0. 077 ٪ ، وكانت متكررة وقت الاحتفاظ أقل من 0. 2 ٪ ،والتي استوفيت المتطلبات التجريبية. منطقة الذروة RSDs للإريتريتول ، xylitol ، sorbitol و maltitol هي 0.809٪ ، 0.450٪ ، 0.705٪ و 0.913٪. كانت متكررة منطقة الذروة أقل من 1٪ ،والتي استوفيت المتطلبات التجريبية.
3.4 حد الكشف
الشكل 7 كروماتوجرام معايير خلط المحليات 1.6mg/mL
ملاحظة: كما يظهر الشكل 7 ، يتم حساب تركيز 1.6 ملغ / مل من خليط المُحليات القياسي ، SNR الثلاثي من حدود الكشف عن الإريتريتول ، الزيليتول ، السوربيتول ، والمالتيتول هي 0.01 ملغ/مل، 0.012 ملغ/ مل، 0.015 ملغ/ مل، و 0.03 ملغ/ مل، والتي تلبي المتطلبات التجريبية.
3.5 مشروب غير بروتيني من العلامة التجارية
الشكل 8 كروماتوجرام من مشروب العلامة التجارية في 2 حقن
العينات | منطقة القمة |
العينة-1 | 209.594 |
العينة-2 | 209.001 |
القيمة المتوسطة الحسابية | 209.298 |
الجدول 6 2 حقن للمشروبات ذات العلامات التجارية
كما يظهر في الرموز، يتم اكتشاف الإريتريتول في المشروبات ذات العلامات التجارية ولا يتم الكشف عن الزيليتول والسوربيتول والمالتيتول. نتائج الاختبار متوافقة مع قائمة المكونات.البيانات الواردة في الجدول هي نتائج اختبارين مع فرق مطلق 0.14% من المتوسط الحسابي، وهو أقل من 10% من المتطلبات القياسية.
3.6 انتباه
وبما أن كاشف مؤشر الانكسار التفاضلي حساس ل كثافة المحلول، فمن المستحسن أن يتم مزج المرحلة المتحركة قبل القيام بالتجربة.
4 الاستنتاج
الطريقة التحليلية المقدمة في هذه المادة تشير إلى المعيار الوطني GB 5009.279-2016 (تحديد الزيليتول والسوربيتول والملتيتول والإريتريتول في الأغذية) ،باستخدام جهاز تصوير للكروماتوجراف السائل عالي الأداء من سلسلة Wayeal LC3200 مع كاشف RIDأظهرت النتائج التجريبية أن الاختبار التكيفي للنظام من الإريتريتول، الزيليتول، السوربيتول ومالتيتول، القمم جيدة وليس هناك قمم أخرى حول القمم المستهدفة.و RSDs لفترة الاحتفاظ هي 0.128٪، 0.128٪، 0.120٪، و 0.077٪، جميعها أقل من 0.2٪. RSDs من منطقة الذروة هي 0.809٪، 0.450٪، 0.705٪، 0.913٪ وأقل من 1٪. SNR = 3 كحد للكشف، ثم حدود الكشف عن الإريتريتول،الزيليتول، السوربيتول، والمالتيتول هي 0.01 mg/mL، 0.012 mg/mL، 0.015 mg/mL، و 0.03 mg/mL. الفرق المطلق بين القياسين هو 0.14٪ من المتوسط الحسابي،التي تقل عن 10٪ من المتطلبات القياسيةجميع البيانات المذكورة أعلاه تظهر أن النتائج تلبي المتطلبات التجريبية.
أرسل استفسارك مباشرة إلينا