2025-11-04
بصفتها نيوكليوتيد، فإن يوريدين 5'-أحادي الفوسفات (UMP) هو وسيط محوري في استقلاب الأحماض النووية داخل الكائنات الحية. وهو النيوكليوتيد الأكثر وفرة في حليب الثدييات، ومتطلبات النظام الغذائي لليوريديلات أعلى بكثير من النيوكليوتيدات الأخرى أثناء نمو وتطور النسل. في السنوات الأخيرة، كشفت الأبحاث أن UMP لا يشارك فقط في استقلاب الطاقة وتخليق الحمض النووي الريبي، ولكنه يعزز أيضًا وظيفة الحاجز المعوي عن طريق تعديل مسارات الإشارات الخلوية. علاوة على ذلك، فإنه يعمل بشكل تآزري مع الفيتامينات القابلة للذوبان في الدهون لتعزيز امتصاص العناصر الغذائية والوظيفة المناعية. يضاف UMP بشكل شائع كمقوي غذائي إلى حليب الأطفال وعلف الماشية/الدواجن، حيث يؤثر نقائه وتركيزه بشكل مباشر على القيمة الغذائية وسلامة المنتج النهائي.
الكلمات المفتاحية:مقوي التغذية الغذائية، UMP، النيوكليوتيدات، كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء.
1. الأجهزة والكواشف
1.1 قائمة تكوين HPLC
الجدول 1 قائمة تكوين HPLC
| رقم. | وحدات | الكمية |
| 1 | كروماتوغرافيا السائل عالية الأداء LC3200 | 1 |
| 2 | مضخة ضغط ثنائية عالية الضغط P3210B | 1 |
| 3 | فرن عمود CT3400 | 1 |
| 4 | AS3210 أوتوسامبلر | 1 |
| 5 | كاشف الأشعة فوق البنفسجية UV3210 | 1 |
| 6 | محطة عمل SmartLab CDS 2.0 | 1 |
| 7 | Nova Element AQC18 5μm 4.6*250mm | 1 |
1.2 الكواشف والمعايير
الجدول 2 قائمة الكواشف والمعايير
| رقم. | الكواشف والمعايير | النقاء |
| 1 | 5'-أحادي الفوسفات | 96.2% |
| 2 | يوريدين | 98% |
| 3 | يوراسيل | 98% |
1.3 مواد التجربة والمعدات المساعدة
منظف بالموجات فوق الصوتية
خلاط دوامة
2. طريقة التجربة وشروطها
عمود الكروماتوغرافيا: Nova Element AQC18، 5μm 4.6x250mm.
3. نتيجة التجربة
3.1 اختبار ملاءمة النظام
أظهر اختبار ملاءمة النظام أن ذروة الهدف كانت ذات شكل جيد، مع عدد لوحات نظري مرتفع ولا توجد قمم متداخلة في محيطها، وبالتالي استوفت جميع المتطلبات التجريبية.
الشكل 1 مخطط كروماتوغرافي لمحلول العمل القياسي ليوريدين 5'-أحادي الفوسفات
الجدول 3 نتائج الاختبار لمحلول العمل القياسي ليوريدين 5'-أحادي الفوسفات
| مركب | وقت الاحتفاظ (دقيقة) | مساحة الذروة (mAU*s) | ارتفاع الذروة | عامل التذييل | الرقم النظري للوحة |
| UMP | 5.559 | 322.525 | 55.643 | 1.130 | 23689 |
3.2 اختبار التكرار
تم حقن محلول العمل القياسي ليوريدين 5'-أحادي الفوسفات (UMP) ست مرات. كان الانحراف المعياري النسبي (RSD) لوقت الاحتفاظ 0.085%، والانحراف المعياري النسبي لمساحة الذروة 0.191%. كانت كلتا القيمتين أقل من الحد المحدد البالغ 2.0%، مما يدل على الامتثال للمتطلبات التجريبية.
الشكل 2 مخططات كروماتوغرافية لاختبار تكرار يوريدين 5'-أحادي الفوسفات (UMP)
الجدول 4 نتائج اختبار التكرار ليوريدين 5'-أحادي الفوسفات (UMP)
| مركب | وقت الاحتفاظ (دقيقة) | مساحة الذروة (mAU*s) |
| يوريدين 5'-أحادي الفوسفات | 5.559 | 322.525 |
| 5.559 | 323.013 | |
| 5.559 | 323.958 | |
| 5.561 | 322.753 | |
| 5.568 | 323.072 | |
| 5.569 | 322.141 | |
| RSD(%) | 0.085 | 0.191 |
3.3 اختبار العينة
كانت مساحة الذروة لمحلول العمل القياسي ليوريدين 5'-أحادي الفوسفات (20 مجم/لتر) 322.525، بينما كانت مساحة محلول العينة المختبرة 274.211. بناءً على طريقة المعيار الخارجي، تم تحديد محتوى UMP في العينة على أنه 17 مجم/لتر.
الشكل 3 مخطط كروماتوغرافي للعينة المختبرة
الجدول 5 نتائج اختبار العينة
| مركب | وقت الاحتفاظ (دقيقة) | مساحة الذروة (mAU*s) | ارتفاع الذروة | SNR | الرقم النظري للوحة |
| 5'-يوريدين أحادي الفوسفات | 5.568 | 274.211 | 47.321 | 14710.024 | 24266 |
3.4 اختبار ملاءمة النظام للمواد ذات الصلة
أظهر اختبار محلول ملاءمة النظام للمواد ذات الصلة أن جميع قمم المركبات كانت ذات شكل جيد، مع أرقام لوحات نظرية عالية ودقة أكبر من 2.0، وبالتالي استوفت المتطلبات التجريبية.
الشكل 4 مخطط كروماتوغرافي لمحلول العمل القياسي ليوريدين 5'-أحادي الفوسفات (UMP)
الجدول 6 نتائج الاختبار لمحلول العمل القياسي ليوريدين 5'-أحادي الفوسفات (UMP)
| مركب | وقت الاحتفاظ (دقيقة) | مساحة الذروة (mAU*s) | ارتفاع الذروة | عامل التذييل | الرقم النظري للوحة |
| 5'-يوريدين أحادي الفوسفات | 5.570 | 326.631 | 8.682 | 1.121 | 24708 |
| يوراسيل | 7.097 | 839.625 | 28.844 | 1.033 | 18284 |
| يوريدين | 17.367 | 446.693 | n.a. | 0.995 | 19136 |
3.5 اختبار تكرار العينة
بعد ست حقن متتالية لمحلول ملاءمة النظام، كانت إمكانية تكرار وقت الاحتفاظ لـ 5'-UMP واليوراسيل واليوريدين 0.031% و0.058% و0.102% على التوالي، في حين كانت إمكانية تكرار مساحة الذروة 0.243% و0.134% و0.134% على التوالي، مما يفي بالمتطلبات التجريبية.
الشكل 5 مخطط كروماتوغرافي لاختبار تكرار العينة
الجدول 7 نتائج الاختبار لتكرار وقت الاحتفاظ للمواد ذات الصلة
| مركب | 5'-يوريدين أحادي الفوسفات | يوراسيل | يوريدين |
| وقت الاحتفاظ (دقيقة) | 5.570 | 7.097 | 17.367 |
| 5.573 | 7.092 | 17.371 | |
| 5.571 | 7.089 | 17.360 | |
| 5.570 | 7.093 | 17.380 | |
| 5.570 | 7.091 | 17.363 | |
| 5.574 | 7.100 | 17.048 | |
| RSD (%) | 0.031 | 0.058 | 0.102 |
الجدول 8 نتائج الاختبار لتكرار مساحة الذروة للمواد ذات الصلة
| مركب | 5'-يوريدين أحادي الفوسفات | يوراسيل | يوريدين |
| مساحة الذروة | 326.631 | 839.625 | 446.693 |
| 326.175 | 841.410 | 447.261 | |
| 326.126 | 841.330 | 447.299 | |
| 327.412 | 842.394 | 448.319 | |
| 327.832 | 841.747 | 447.324 | |
| 327.850 | 842.911 | 448.083 | |
| RSD (%) | 0.243 | 0.134 | 0.134 |
3.6 اختبار الحساسية للمواد ذات الصلة
نسبة الإشارة إلى الضوضاء للذروة الرئيسية لـ 5'-UMP في محلول اختبار الحساسية للمواد ذات الصلة أكبر بكثير من 3، مما يفي بالمتطلبات التجريبية.
الشكل 6 مخطط كروماتوغرافي لمحلول اختبار حساسية المواد ذات الصلة
الجدول 9 نتائج الاختبار لمحلول حساسية المواد ذات الصلة
| مركب | وقت الاحتفاظ (دقيقة) | مساحة الذروة (mAU*s) | ارتفاع الذروة | SNR | الرقم النظري للوحة |
| 5'-يوريدين أحادي الفوسفات | 5.573 | 26.797 | 4.638 | 949.156 | 24519 |
3.7 اختبار المواد المرجعية والمحلول النموذجي للمواد ذات الصلة
كانت مساحة الذروة للمحلول المرجعي (17 مجم/لتر) 275.856. كانت مساحة الذروة الإجمالية للشوائب في المحلول المختبر، باستثناء 5'-يوريدين أحادي الفوسفات، 38.021. الحساب بطريقة المعيار الخارجي، محتوى الشوائب في العينة هو 2.343 مجم/لتر.
الشكل 7 مخطط كروماتوغرافي لاختبار المحلول المرجعي للمواد ذات الصلة
الجدول 10 نتائج الاختبار للمحلول المرجعي للمواد ذات الصلة
| مركب | وقت الاحتفاظ (دقيقة) | مساحة الذروة (mAU*s) | ارتفاع الذروة | SNR | الرقم النظري للوحة |
| 5'-يوريدين أحادي الفوسفات | 5.572 | 275.856 | 47.414 | 14576.232 | 24512 |
الشكل 8 مخطط كروماتوغرافي لاختبار المحلول النموذجي للمواد ذات الصلة
الجدول 11 نتائج الاختبار للمحلول النموذجي ذي الصلة
| مركبات | وقت الاحتفاظ (دقيقة) | مساحة الذروة (mAU*s) | ارتفاع الذروة | SNR | الرقم النظري للوحة |
| 1 | 3.847 | 7.952 | 1.412 | 433.935 | 114734.178 |
| 2 | 4.178 | 4.358 | 0.710 | 218.248 | 11310 |
| 5'-يوريدين أحادي الفوسفات | 5.548 | 12576.642 | 1964.994 | 603778.520 | 196687.093 |
| يوراسيل | 7.093 | 218.727 | 26.939 | 8277.393 | 18342 |
| يوريدين | 17.355 | 2810.366 | 145.230 | 44624.340 | 19058 |
4. الخلاصة
في هذه التجربة، بالإشارة إلى "GB 1903.69-2024 المعيار الوطني لسلامة الأغذية: معزز التغذية الغذائية 5'-يوريدين أحادي الفوسفات،" تم إجراء التحليل باستخدام نظام كروماتوغرافيا السائل عالي الأداء Wayeal LC3200 مزودًا بكاشف الأشعة فوق البنفسجية. تظهر النتائج التجريبية أن اختبار ملاءمة النظام أظهر أشكال ذروة جيدة لجميع المركبات، وأرقام لوحات نظرية عالية، ودقة تزيد عن 2.0، مما يفي بالمتطلبات التجريبية. كان تكرار وقت الاحتفاظ لمحلول العمل القياسي ليوريدين 5'-أحادي الفوسفات والمواد ذات الصلة أقل من 0.2%، وكان تكرار مساحة الذروة أقل من 0.3%، مما يشير إلى إمكانية تكرار جيدة. أظهر محلول اختبار الحساسية للمواد ذات الصلة نسبة إشارة إلى ضوضاء للذروة الرئيسية ليوريدين 5'-أحادي الفوسفات أكبر بكثير من 3، مما يفي بالمتطلبات التجريبية. كانت جميع نتائج اختبار العينة طبيعية. البيانات المذكورة أعلاه تفي بمتطلبات الأداة المحددة في الطريقة القياسية.
أرسل استفسارك مباشرة إلينا
