2025-07-29
تحديد بقايا المضادات الحيوية من الكينولون في لحوم الدجاج بواسطة نظام Wayeal’s LCMS-TQ9200 Liquid Chromatography Mass Spectrometry (LC-MS/MS)
تحدد "GB 31650-2019"، وهو المعيار الوطني لسلامة الأغذية في الصين "الحدود القصوى المتبقية للأدوية البيطرية في الأطعمة"، الحدود القصوى المتبقية (MRLs) لبعض المضادات الحيوية من الكينولون في المنتجات الغذائية المشتقة من الحيوانات. بالإضافة إلى ذلك، يحدد "GB 31658.17-2021"، وهو المعيار الوطني لسلامة الأغذية "تحديد بقايا التتراسيكلين والسلفوناميدات والكينولونات في الأطعمة ذات الأصل الحيواني بواسطة كروماتوغرافيا السائل - مطياف الكتلة الترادفي"، طريقة التحليل LC-MS/MS وحدود التقدير (LOQs) المقابلة لـ 13 مضادًا حيويًا من الكينولون. تقدم مذكرة التطبيق هذه النتائج التي تم التحقق من صحتها بنجاح لتحليل 13 بقايا من المضادات الحيوية من الكينولون في لحوم الدجاج باستخدام نظام Wayeal's LCMS-TQ9200 triple quadrupole liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS).
الكلمات المفتاحية:LC-MS/MS، الكينولونات، بقايا الأدوية البيطرية، سلامة الأغذية.
نظام Wayeal LCMS-TQ9200 Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry
طريقة كروماتوغرافيا السائل
عمود الكروماتوغرافيا: C18 3.0x100mm
المرحلة المتحركة: أ: 0.1٪ حمض الفورميك ميثانول، ب: 0.1٪ محلول حمض الفورميك
معدل التدفق: 0.4 مل/دقيقة
درجة حرارة العمود: 45 درجة مئوية
حجم الحقن: 3 ميكرولتر
طريقة قياس الطيف الكتلي
الجدول 1 معلمات مصدر أيون قياس الطيف الكتلي
| مصدر الأيون | ESI، وضع الأيون الموجب |
| جهد مصدر الأيون | 5500 فولت |
| معدل تدفق غاز إزالة المذيب | 18000 مل/دقيقة |
| معدل تدفق غاز المرذاذ | 2000 مل/دقيقة |
| معدل تدفق غاز الستارة | 5000 مل/دقيقة |
| معدل تدفق غاز التصادم | 800 ميكرولتر/دقيقة |
| درجة حرارة إزالة المذيب | 450 درجة مئوية |
| درجة حرارة غاز الستارة | 150 درجة مئوية |
الجدول 2 معلمات قياس الطيف الكتلي لكل مركب
| النطاق الخطي | Q1 | Q3 | إمكانات إزالة التجميع (V) | طاقة التصادم (V) |
| 111.26 | 262.1 | 244* | 100 | 25 |
| 160 | 100 | 50 | ||
| 59.64 | 262.1 | 202 | 115 | 44 |
| 244.1* | 115 | 24 | ||
| 70.16 | 320.1 | 302.1* | 90 | 27 |
| 233.2 | 90 | 33 | ||
| 23.74 | 321.2 | 234 | 100 | 38 |
| 303* | 100 | 30 | ||
| 37.91 | 332.2 | 231 | 100 | 49 |
| 288 | 100 | 25 | ||
| 28.70 | 334.1 | 316* | 110 | 29 |
| 233.2 | 110 | 35 | ||
| 48.54 | 352.1 | 265.1* | 110 | 31 |
| 334 | 110 | 29 | ||
| 105.74 | 358.1 | 340.1* | 100 | 32 |
| 283.1 | 100 | 32 | ||
| 35.97 | 360.2 | 316.1 | 110 | 27 |
| 245.1* | 110 | 38 | ||
| 51.67 | 362.1 | 318.3 | 75 | 25 |
| 261.2* | 75 | 34 | ||
| 190.11 | 363.2 | 72.1* | 100 | 25 |
| 345.2 | 100 | 29 | ||
| 38.11 | 386.1 | 299.1* | 110 | 38 |
| 342 | 110 | 27 | ||
| 25.85 | 400.2 | 299.1 | 110 | 38 |
| 382.2 | 120 | 30 |
ملاحظة: الأيون المحدد بعلامة * هو الأيون الكمي
1. نتيجة التجربة
1.1 شكل الذروة
اكتمل تحديد 13 مضادًا حيويًا من الكينولون في غضون 11 دقيقة. كان لجميع الذروات أشكال ذروة جيدة دون ظاهرة التذييل الشائعة للمضادات الحيوية من الكينولون. أظهرت جميع المركبات استجابات إشارة قوية، تلبي متطلبات التقدير التجريبي.الشكل 1 مخطط كروماتوغرافي لـ 13 مضادًا حيويًا من الكينولون
1.2. النطاق الخطي
تم تخفيف كمية مناسبة من محلول قياسي مختلط من الكينولون تسلسليًا لإعداد معايير معايرة تمتد على تركيزات من 2 إلى 500 نانوغرام/مل. أظهر تقييم الخطية توافقًا ممتازًا مع التركيزات الاسمية، مع جميع الانحرافات ضمن الحد الأقصى المسموح به للخطأ. تراوح معامل التحديد (R²) من 0.9921 إلى 0.9998، مما يؤكد الخطية المرضية لجميع المكونات.
الجدول 3 جدول النطاق الخطي
المركبات
| النطاق الخطي | معامل الارتباط الخطي R | 2حمض أوكسولينيك |
| 111.26 | 0.9973 | سيبروفلوكساسين |
| 59.64 | 0.9973 | نورفلوكساسين |
| 70.16 | 0.9973 | إينوكساسين |
| 23.74 | 0.9973 | سيبروفلوكساسين |
| 37.91 | 0.9973 | بيفلوكساسين |
| 28.70 | 0.9973 | لوميفلوكساسين |
| 48.54 | 0.9973 | دانوفلوكساسين |
| 105.74 | 0.9973 | إنروفلوكساسين |
| 35.97 | 0.9973 | أوفلوكساسين |
| 51.67 | 0.9973 | ماربوفلوكساسين |
| 190.11 | 0.9973 | سارافلوكساسين |
| 38.11 | 0.9973 | ديفلوكساسين |
| 25.85 | 0.9973 | الشكل 2 نتائج النطاق الخطي لمضادات حيوية مختارة من الكينولون |
1.3. حد الكشف (LOD) وحد التقدير (LOQ)
يحدد المعيار الوطني لسلامة الأغذية GB 31658.17-2021، حد الكشف (MDL) يبلغ 2 ميكروغرام/كجم وحد التقدير (MQL) يبلغ 10 ميكروغرام/كجم. في هذه الطريقة، أظهرت جميع المركبات المستهدفة نسب إشارة إلى ضوضاء أكبر بكثير من 3 عند 2 ميكروغرام/كجم و 10 عند 10 ميكروغرام/كجم، بما يتوافق تمامًا مع متطلبات الحساسية المحددة في المعيار الوطني.
الجدول 4 نسب الإشارة إلى الضوضاء لحدود الكشف والتقدير للمركبات المستهدفة
المركب
| SNR (S/N) | 2 ميكروغرام/كجم | |
| 10 ميكروغرام/كجم | حمض أوكسولينيك | |
| 111.26 | 359.11 | فلوميكوين |
| 59.64 | 244.73 | نورفلوكساسين |
| 70.16 | 392.57 | إينوكساسين |
| 23.74 | 80.26 | سيبروفلوكساسين |
| 37.91 | 99.26 | بيفلوكساسين |
| 28.70 | 125.81 | لوميفلوكساسين |
| 48.54 | 165.84 | دانوفلوكساسين |
| 105.74 | 348.10 | إنروفلوكساسين |
| 35.97 | 120.82 | أوفلوكساسين |
| 51.67 | 287.26 | ماربوفلوكساسين |
| 190.11 | 399.38 | سارافلوكساسين |
| 38.11 | 160.79 | ديفلوكساسين |
| 25.85 | 149.29 | الشكل 3 مخططات LOD/LOQ للكينولونات المختارة |
1.4. اختبار الدقة
تم حقن محلول قياسي مختلط من المضادات الحيوية من الكينولون بثلاثة تركيزات (10 و 50 و 100 نانوغرام/مل) 6 مرات لمقارنة اختلافات وقت الاحتفاظ ومنطقة الذروة. كما هو موضح في الجدول أدناه، أظهرت جميع مركبات الكينولون المختبرة انحرافات في وقت الاحتفاظ أقل من 0.3٪ وانحرافات في منطقة الذروة أقل من 5٪، بما يتوافق تمامًا مع متطلبات المعيار الوطني لـ RSD ≤15٪ للدقة.
الجدول 5 اختبار الدقة للمركبات المختلفة
الشكل 4 مخططات الدقة للمركبات المختارة
2. الخلاصة
استخدمت هذه الطريقة نظام Wayeal LCMS TQ9200 liquid chromatography-tandem mass spectrometry لتحديد المضادات الحيوية من الكينولون في عينات الدجاج. أظهرت البيانات التجريبية أداءً كروماتوغرافيًا ممتازًا بأشكال ذروة محددة جيدًا وغياب التذييل لجميع المواد التحليلية، مع تلبية متطلبات الحساسية المحددة في المعايير الوطنية. أظهرت الطريقة خطية جيدة بمعاملات ارتباط (R²) تتجاوز 0.99 لجميع منحنيات المعايرة، إلى جانب إمكانية إعادة إنتاج ممتازة كما يتضح من انحرافات وقت الاحتفاظ أقل من 0.3٪ واختلافات منطقة الذروة أقل من 5٪. أظهر تحليل ثلاث دفعات من عينات الدجاج التي تم إعدادها بشكل مستقل عدم وجود بقايا قابلة للكشف من المضادات الحيوية من الكينولون. تؤكد هذه النتائج أن طريقة التحليل المقترنة بنظام Wayeal LC-MS/MS قادرة تمامًا على تلبية متطلبات الكشف النوعي والكمي الروتينية للمواد التحليلية المستهدفة في عينات الاختبار.
أرسل استفسارك مباشرة إلينا
