تحديد محتوى Phoxim في الأرز بواسطة نظام Wayeal LCMS-TQ9200 اللوني السائل - نظام قياس الطيف الكتلي الترادفي

فوكسيم، ذات الصيغة الكيميائية C₁₂هـ₁₅ن₂أوه₃إنّه مبيد حشرات مصنوع من الفوسفور العضويّ، يحقق تأثيره الحشريّ عن طريق تثبيط نشاط الكولينستراز في الآفات، ويعطل الوظيفة الطبيعية لنظامها العصبيّ.ومنع أنشطتهم الفسيولوجية العاديةبالمقارنة مع المبيدات الحشرية الأخرى مثل البيريثرويدات والكرباماتات ، يتميز فوكسيم بمجموعة واسعة من المبيدات الحشرية ، والفعالية المتميزة في مكافحة يرقات اللبيدوبتران ،أسعار معتدلة، وسهولة التطبيق، مما يجعلها مفضلة على نطاق واسع من قبل المنتجين الزراعيين. في التطبيق العملي، فوكسيم عرضة للاستخدام المفرط أو استخدام خارج نطاق الموصى به،مما يؤدي إلى مشكلة واسعة النطاق من مخلفات المبيدات الحشرية في المنتجات الزراعيةيمكن أن تؤدي بقايا المبيدات إلى العديد من الآثار الضارة. من ناحية، فإنها تتراكم في جسم الإنسان من خلال السلسلة الغذائية، مما قد يسبب التسمم الحاد، والأضرار المزمنة،و ردود فعل فيزيولوجية غير طبيعية أخرىمن ناحية أخرى، يمكن أن تدخل البيئة من خلال تصريف الأراضي الزراعية،زيادة تركيز مكونات مبيدات الآفات في البيئة وبالتالي التأثير غير المباشر على البيئة وصحة الإنسانعلى وجه الخصوص ، فإن Phoxim يشكّل مخاطر محتملة للسكان الحساسين مثل الأطفال والنساء الحوامل.إذا كان هؤلاء الأشخاص يتناولون كميات مفرطة من الفوكسيف أو يتراكم مستويات عالية منه في أجسامهمقد يؤدي إلى ضعف وظائف الأعضاء وآثار صحية ضارة.أصبح الكشف عن بقايا مبيدات الحشرات في المنتجات الزراعية عنصرًا أساسيًا وحاسمًا في مراقبة سلامة الأغذية.

تم إجراء هذه التجربة وفقًا للمعيار الوطني GB/T 20770-2008."تحديد 486 مبيدات و بقايا كيميائية ذات صلة في الحبوب عن طريق الكروماتوغرافيا السائلة - طيف الكتلة التانديميتم تحليل محتوى الفوكسيم في الأرز باستخدام نظام الـ Wayeal LCMS- TQ9200 للكروماتوجرافية السائلة - طيف طيف الكتلة.هذا البروتوكول مجهز بنظام الـ Wayeal للكروماتوغرافيا السائلة - طيف الطيف الكلي، والتي تلبي متطلبات الكشف النوعي والكمي الروتيني لعينات الاختبار.

الكلمات الرئيسية: طيف الكتلة رباعي القطب الثلاثي، فوكسيم، بقايا المبيدات.

1أداة ومستجيبات

1.1 قائمة تكوينات الأدوات

الجدول 1 قائمة تشكيلات الأدوات

1.2 المفاعلات والمعايير

الجدول 2 المفاعلات والمعايير

1.3 المواد التجريبية والمعدات المساعدة

خلاط الدوران

أجهزة طرد مركزي عالية السرعة؛

التوازن التحليلي

2طريقة التجربة

2.1 تحضير المحلول

2.1.1 Acetonitrile-Acetic Acid (99+1، v/v): قياس 10mL من حمض الخل وإضافته إلى 990mL من acetonitrile، ثم مزج جيدًا.

2.1.2 مادة الأمونيوم فورمات-حلول حمض النمل المائي (2mmol/L): يزن 0.1261g من مادة الأمونيوم فورمات، يذوب في ويتم تخفيفه إلى 1000mL مع 0.01% محلول حمض النمل المائي،ثم هز جيدا حتى متجانسة.

2.1.3 فورمات الأمونيوم - حمض النمل في محلول الميثانول (2 mmol/L): يزن 0.1261 g من فورمات الأمونيوم، يذوب فيه ويخفف إلى 1000 ml مع 0.01% حمض النمل في محلول الميثانول،ثم هز جيدا حتى متجانسة.

2.2 المعالجة المسبقة للعينات

يزن 5 غرام من عينة الاختبار (بدقة±0.01 غرام) إلى أنبوب طرد مركزي 50 مل. إضافة 10 مل من الماء، والدوامة لخلطها جيدا، والترك لمدة 30 دقيقة. إضافة 15 مل من محلول حمض الأسيتونيتريل - الخلوي و homogenizer السيراميكي واحد،ثم هز بقوة لمدة 1 دقيقةبعد ذلك، أضف 6 غرام من كبريتات المغنيسيوم الخالية من الماء و 1.5 غرام من حمض الأسيتات الصوديوم، هز بقوة لمدة دقيقة واحدة أخرى، ثم طرد الطرد المركزي عند 4200 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق.تحويل الكمية فوق المنتشرة إلى أنبوب الطرد المركزي البلاستيكي الذي يحتوي على عامل تجفيف ومواد تنقية (باستخدام 150mg من كبريتات المغنيسيوم الخالية من الماء)50 ملغ من C18 و 50 ملغ من PSA لكل ملليتر من المستخلص). الطرد المركزي عند 4200 دورة / دقيقة لمدة 5 دقائق ، ثم سحب السوبرناتنت وإدخالها من خلال مرشح غشاء ميكروبورزية لتحديد لاحق.

2.3 ظروف التجربة

2.3.1 ظروف تصوير الكروماتوجرافية السائلة

أعمدة الكروماتوجرافية: C18 1.7μم 2.1x50 ملم؛

المرحلة المتنقلة: المرحلة أ: حمض فورمات الأمونيوم النملي في محلول الميثانول (2mmol/L) ؛ المرحلة ب: محلول مائي من حمض فورمات الأمونيوم النملي (2mmol/L).

معدل التدفق: 0.3mL/min

حرارة العمود: 40°ج.

حجم الحقن: 5μL.

2.3.2 ظروف طيف الكتلة

الجدول 3 معايير طيف الكتلة المركبة

ملاحظة: الأيون المميز بـ * هو الأيون الكمي.

3نتيجة التجربة

3.1 الرموز الصبغية القياسية

تم الانتهاء من تحديد الفوكسيم في غضون 6.5 دقيقة كما هو مبين في الشكل 1 ، تظهر قمة المركب شكل قمة جيد والاستجابة المرضية ،تلبية متطلبات التحليل التجريبي.

الشكل 1 كروماتوجرام Phoxim

3.2 النطاق الخطي

خذ كميات مناسبة من محلول فوكسيم القياسي و قم بتخفيفه بشكل متسلسل بمصفوفة فارغة للحصول على تركيزات 10، 5، 2، 1، 0.501، و 0.05ng/mL لإعداد منحنى المعايرة. تم تحديد النطاق الخطي من 0.05 إلى 10ng/mL.كان الانحراف في نتائج الكشف الخطية من التركيزات المعروفة ضمن الحد الأقصى للمعايير المسموح بهامعامل الارتباط (R²) كان 0.99971، مما يشير إلى علاقة خطية ممتازة للمحلل.

الشكل 2 منحنى فوكسيم القياسي

3.3 قابلية التكرار

محلول فوكسيم بثلاث تركيزات (0.5وقد تم حقن الـ 10ng/ mL ست مرات متتالية. وتشير النتائج، كما هو مبين في الجدول أدناه، إلى أن الانحرافات القياسية النسبية (RSDs) لجميع نقاط البيانات عندوالتركيزات المنخفضة من الفوكسيم داخل 5%، تلبية المتطلبات التجريبية.

الجدول 4 اختبار التكرار لفوكسيم في تركيزات عالية ومتوسطة ومنخفضة

3.4 استرداد الطفرة

تم إضافة محلول فوكسيم القياسي إلى العينة لتحقيق تركيز 4ng / mL ، ثم تم تحليل العينة بواسطة LC-MS. تظهر النتائج في الشكل 3.كان متوسط القيمة من ستة حقن متتالية.194ng/mL، مع RSD من 4.623٪ ومعدل الاسترداد من 104.85٪، تلبية المتطلبات التجريبية.

الشكل 3 كروماتوجرام استعادة فوكسيم سبايك

3.5 بقايا فارغة

بعد الحقن المستمر للمحلول القياسي 10ng/mL، تم بعد ذلك حقن عينة مصفوفة فارغة لتقييم وتحديد أي بقايا فارغة.يشير إلى عدم الكشف عن بقايا فارغة.

الشكل 4 كروماتوجرام فارغ

3.6 اختبار العينة

تم معالجة العينة A وفقًا لطريقة المعالجة السابقة الموصوفة في هذا البروتوكول ، وكانت نسبة الفوكسيم في العينة A 9552μغرام/كيلوغرام

الشكل 5 كروماتوجرام فوكسيم في العينة A

4الاستنتاج

تستخدم هذه الطريقة نظام لقطر الكتلة المتزامن للكروماتوجرافي السائل Wayeal LCMS-TQ9200 لتحديد بقايا الفوكسيم في الأطعمة النباتية.

تظهر البيانات أن هذه الطريقة تنتج قممًا جيدة في تقييم الطيف الجماعي ولا توجد رذاذ.²أكبر من 0999• التكرار عند تركيزات عالية ومتوسطة ومنخفضة هو ضمن 5٪ ومعدل استعادة الذروة هو 104.85٪. لم يتم ملاحظة نقل النظام بعد عينات التركيز العالي.هذه النتائج تؤكد أن هذه الطريقة، مجهزة بنظام الـ Wayeal للكروماتوغرافيا السائلة - طيف الطيف الكلي ، تلبي متطلبات التحليلات النوعية والكمية الروتينية للمحللات المستهدفة في عينات الاختبار.