2025-09-22
الكلمات الرئيسية: بروبرانولول، الكروماتوجراف السائل عالي الأداء، شوائب النيتروزامين
1أدوات ومستجيبات
1.1 قائمة تكوينات نظام HPLC
| لا، لا، لا | وحدات | كمية |
| 1 | كاشف الأشعة فوق البنفسجية UV3400 | 1 |
| 2 | P3400B مضخة رباعية | 1 |
| 3 | CT3400 فرن العمود | 1 |
| 4 | AS3400 جهاز أخذ العينات | 1 |
| 5 | محطة عمل SmartLab NetCDS | 1 |
| 6 | C18 250 * 4.6mm، 5μm | 1 |
1.2 المفاعلات والحلول القياسية
الجدول 2 المفاعلات والحلول القياسية
| لا، لا، لا | المفاعلات والمعايير | النقاء |
| 1 | أيسيتونيتريل | الدرجة HPLC |
| 2 | كبريتات الصوديوم | AR |
| 3 | تيتربوتيلامونيوم دي هيدروجين فوسفات | AR |
| 4 | NaOH | AR |
| 5 | حمض الكبريتيك | AR |
| 6 | نيتروسوبرانولول | 99.85% |
1.3 مواد التجربة والمعدات المساعدة
منظف بالموجات فوق الصوتية
خلاط الدوران
2طريقة التجربة
2.1 تحضير المحلول
2.1.1 2mol/L محلول هيدروكسيد الصوديوم: خذ 4 غرام من هيدروكسيد الصوديوم، وأحل في 50 مل من الماء، وخلط جيدا.
2.1.2 حمض الأسيتونيتريل-الماء-الكبريتيك (55:45:0.1) الخليط: خذ 1.6 غرام من كبريتات الصوديوم الدوديسيل و 0.31 غرام من ثنائي هيدروجين فوسفات التيتروبوتيلامونيوم، وأضف 1 ملليتر من حمض الكبريتيك، و 450 ملليتر من الماء، و 550 ملليتر من الأسيتونيتريل. ضبط الحمية الحمضية 3.3 مع محلول هيدروكسيد الصوديوم 2 مول / لتروخلطها جيداً
2.1.3 المذيب: نفس المرحلة المتحركة
2.1.4 محلول خطي: يزن بدقة كمية مناسبة من معيار N-Nitroso-propranolol المرجعي.يحل ويتم تخفيفه بالمرحلة المتحركة للحصول على محلول يحتوي على حوالي 200ng لكل 1mL كمحلول أساسي قياسيثم نقلها بدقة أحجام مناسبة من محلول المخزون في ستة 100mL القارورة الحجمية، مخففة إلى العلامة مع المرحلة المتحركة،وتخليط جيدًا لإعداد سلسلة قياسية من منحنيات العمل بتركيزات 0.8ng/mL و 1ng/mL و 2ng/mL و 3ng/mL و 4ng/mL و 6ng/mL
2.1.5 الحل القياسي المرجعي: قم بتوزيع كمية مناسبة من N-Nitroso-propranolol القياسي المرجعي بدقةيحل ويتم تخفيفه بالمرحلة المتحركة لتحضير محلول يحتوي على حوالي 2ng من N-Nitroso-propranolol لكل 1mL كحل معيار للمعايير.
2.2 إعداد العينة
2.2.1 عينة محلول: يزن بدقة كمية مناسبة من أقراص بروبرانولول هيدروكلوريد مسحوق رقيق، يذوب ويتخفف مع المرحلة المتحركة لإعداد محلول يحتوي على حوالي 0.27 ملغ من بروبرانولول لكل 1 ملليتر كمحلول عينة.
2.2.2 دقة الحل: يزن بدقة حوالي 297 ملغ من أقراص بروبرانولول هيدروكلوريد مسحوق رقيق في قنينة حجمية من 100 مل.إضافة كمية مناسبة من محلول N-Nitroso-propranolol المعيار، يذوب ويتخفف إلى علامة مع المرحلة المتحركة لإعداد عينة 100٪ الممزقة. خلط جيدا للحصول على محلول الدقة.
3نتيجة التجربة
3.1 الخصوصية
الشكل 2 كروماتوجرام الخصوصية
ملاحظة: المذيب لا يتداخل مع الكشف عن N-Nitroso-propranolol ،كما أن القمم الكروماتوغرافية للشوائب الأخرى في محلول الاختبار لا تتداخل مع تحديد شوائب N-Nitroso-propranolol..
3.2 الاختبار الخطي
الشكل 3 المنحنى القياسي لنزيف N-Nitroso-propranolol
ملاحظة: تظهر النتائج التجريبية أن معامل الارتباط (R) من منحنى اختبار شوائب N-Nitroso-propranolol يزيد عن 0.999، تلبية متطلبات الاختبار.
3.3 اختبار التكرار
الشكل 4 كروماتوجرامات ستة حقن متكررة لمعايير 2ng / mL
الجدول 3 بيانات ستة حقن متكررة لمعيار 2ng/mL
| مركب | وقت الاحتفاظ (دقيقة) | مساحة الذروة (mAU) |
| نيتروسوبرانولول | 2.935 | 3.963 |
| 2.934 | 3.979 | |
| 2.933 | 3.984 | |
| 2.932 | 3.964 | |
| 2.932 | 3.996 | |
| 2.932 | 3.944 | |
| المتوسط | 2.933 | 3.972 |
| RSD (%) | 0.043 | 0.464 |
ملاحظة: كما هو مبين في الجدول أعلاه، تكرار الاحتفاظ بالوقت من N- نيتروزو- بروبرانولول هو 0. 043٪ وتكرار منطقة الذروة هو 0. 464٪، مما يشير إلى تكرار جيد.
3.4 اختبار الدقة
الشكل 5 الكروماتوجرامات الدقيقة المتداخلة لـ N-Nitroso-propranolol في أقراص
الجدول 4 دقة أقراص بروبرانولول هيدروكلوريد (N- نيتروزو- بروبرانولول)
| المستوى | مستوى الخلفية (ng) | كمية الزيادة (ng) | المبلغ المسترد (ng) | معدل الاسترداد (%) | المتوسط (%) |
| 100% | 0.00 | 200.00 | 201.662 | 100.831 | 101.38 |
| 100% | 0.00 | 197.331 | 98.666 | ||
| 100% | 0.00 | 193.958 | 96.979 | ||
| 100% | 0.00 | 206.093 | 103.046 | ||
| 100% | 0.00 | 209.416 | 104.708 | ||
| 100% | 0.00 | 208.157 |
104.079 |
ملاحظة: تراوحت نسبة استرداد N-Nitroso-propranolol في ست عينات من 96.98٪ إلى 104.71% ، مع متوسط استرداد 101.38٪. تظهر الطريقة دقة جيدة ويمكن تكرارها.
3.5 اختبار LOD
الشكل 6 كروماتوجرام اختبار لـ N-Nitroso-propranolol عند تركيز 2ng/mL قياسي
الجدول 5 بيانات الاختبار المرجعي لـ N-Nitroso-propranolol عند التركيز القياسي 2ng/mL
| الاسم | وقت الاحتفاظ (دقيقة) | مساحة الذروة (mAU) | SNR |
| نيتروسوبرانولول | 2.946 | 3.994 |
39.689 |
ملاحظة: بناءً على بيانات الاختبار للمعيار المرجعي لـ N-nitroso-propranolol بتركيز 2ng/mL في الجدول أعلاه،يتم حساب الحد النظري للكشف عن N-nitroso-propranolol كـ 0.151ng/mL باستخدام نسبة 3: 1 من الإشارة إلى الضوضاء كمعيار حد للكشف.
3.6 اختبار لوحة العلامة التجارية
الشكل 7 الكروماتوجرام الاختبار للحبوب العلامة التجارية
ملاحظة: لم يتم اكتشاف N- نيتروزوبروبرانولول في أقراص العلامة التجارية.
4الاستنتاج
A study on the nitrosamine impurity N-nitroso-propranolol in propranolol hydrochloride tablets was conducted in accordance with the FDA's recently published guidance document on establishing acceptable intake levels for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRI)وفقًا لهذه الوثيقة، يتم حساب قيمة القيمة المقبولة (AI) على أنها 1500 ng/ يوم..تم التحقق من صحة الطريقة باستخدام سلسلة الكروماتوجرافي السائل عالية الأداء (HPLC) من Wayeal (مجهزة بمستشعر الأشعة فوق البنفسجية.تم تحليل عينات الأقراص باستخدام طريقة الكشف المعتمدة، ولم يتم الكشف عن أي شوائب نيتروزامين N-nitroso-propranolol. جميع البيانات المذكورة أعلاه تتوافق مع متطلبات الصيدلة الخاصة بالأجهزة.
أرسل استفسارك مباشرة إلينا
