تحديد محتوى إيثيل مالتول في زيت فول الصويا بواسطة Wayeal LCMS-TQ9200 نظام التلوين السائل - طيف الكتلة المتزامن

يستخدم إيثيل مالتول على نطاق واسع في صناعة الأغذية كمنع طعم ومتعديل ذو كفاءة عالية وعريضة لتكثيف وتنسيق النغمات الحلوة والفاكهة والكريمة في المنتجات الغذائية.وفقًا للمعيار الوطني الصيني لسلامة الأغذية لاستخدام المواد المضافة للأغذية (GB 2760-2024)، يسمح باستخدام إيثيل مالتول بمستويات مناسبة وفقا لاحتياجات الإنتاج في فئات غذائية محددة.

ومع ذلك، وبما أن إيثيل مالتول يمكن أن يخفي بشكل فعال النكهات التأكسدية في الزيوت ويعزز مذاقها،هناك حوادث متكررة في السنوات الأخيرة تتضمن إضافة غير مصرح بها إلى الزيوت النباتية، بما في ذلك زيت فول الصوياو طريقة تحليلية فعالة لمراقبة إضافة غير قانونية من إيثيل مالتول في زيت فول الصويا و زيوت الطعام الأخرى لها أهمية عملية كبيرة لضمان سلامة الأغذية، حماية حقوق المستهلكين، والحفاظ على نظام السوق.

يحتوي زيت فول الصويا على تكوين مصفوف معقد ، يتكون أساسا من الدهون الثلاثية والأحماض الدهنية الحرة والفوسفوليبيدات والتوكوفيرول الطبيعية.هذه المكونات المتواجدة يمكن أن تسبب تدخلات كبيرة في المصفوفة أثناء التحليل، مما يؤثر بشدة على الكشف عن تحليل المستهدف إيثيل مالتول.الكروماتوجرافي السائل - طيف الكتلة التزامن يجمع بين قدرة الفصل الممتازة للكروماتوجرافي السائل مع الانتقائية العالية والحساسية العالية لطيف الكتلة التزامنأصبحت هذه التقنية أداة قوية لتحليل وتحديد آثار المواد المضافة غير القانونية في المنتجات الغذائية.

الكلمات الرئيسية:زيت فول الصويا، إيثيل مالتول.

1أدوات ومستجيبات

1.1 قائمة تكوين نظام LCMS

الجدول 1 قائمة تشكيلات الأدوات

1.2 المفاعلات والمعايير

الجدول 2 جدول المفاعلات والمعايير

1.3 المواد التجريبية والمعدات المساعدة

منظف بالموجات فوق الصوتية

خلاط الدوران

طرد مركزي عالي السرعة

2طريقة التجربة

2.1 ظروف تصوير الكروماتوجرافية السائلة

العمود: C18، 1.7 ميكرومتر، 2.1 × 50 ملم

المرحلة المتنقلة: A: 0.1% من حمض النمل في الماء؛ B: 0.1% من حمض النمل في الميثانول

معدل التدفق: 0.3 مل/دقيقة

درجة حرارة العمود: 40 °C

حجم الحقن: 2μL

2.2 طريقة المعالجة المسبقة

يزن 10 غرام من العينة بدقة (بدقة 0.01 غرام) ويتم نقلها إلى أنبوب طرد مركزي من البولي بروبيلين 50 مل.والطرد المركزي عند 9،000دورة/دقيقة لمدة 10 دقائق عند درجة حرارة 4 درجة مئوية. نقل المادة المرتفعة إلى أنبوب اختبار مغلق بمقدار 20 مل. كرر استخراج طبقة الزيت المتبقية مع 10 مل أخرى من الميثانول.الجمع بين السوبرنيتانت، وتخفيفه إلى 20 مل مع الميثانول. تصفية المحلول من خلال غشاء ميكروبوروس (0.22 ميكرو مترا، المرحلة العضوية) واستخدامه لتحليل الكروماتوجرافيا السائلة-تاندم طيف الكتلة.

2.3 تحضير المحلول

2.3.1 محلول إيثيل مالتول القياسي: 100μg/mL

2.3.2 محلولات العمل القياسية للمالتول الإيثيلي:يتم تخفيف محلول مخزون إيثيل مالتول العادي بخطوات مع الميثانول لإعداد محلولات قياسية بتركيزات 1.25μg/mL و 2.5μg/mL و 5μg/mL و 25μg/mL و 50μg/mL.يزن بدقة 10g (دقة إلى 0.01 غرام) من عينة سلبية تتوافق مع عينة الاختبار، إضافة 200μL من كل محلول قياسي بشكل منفصل، ومعالجة الخلطات في وقت واحد مع عينات الاختبار من خلال الاستخراج.ثم أعدت محلولات العمل مع تركيزات النهائية من 12.5ng/mL، 25ng/mL، 50ng/mL، 250ng/mL، و 500ng/mL. إعداد هذه المحلول مباشرة قبل الاستخدام.

2.3.3 0.1% محلول مائى من حمض النمل:خذ 1 مل من حمض النمل وندق إلى 1000 مل مع الماء. تصفية من خلال غشاء (0.22 ميكرو مترا، المرحلة المائية) قبل الاستخدام.

2.3.4 0.1% من حمض النمل في محلول الميثانول:خذ 1 مل من حمض النملة وقم بتخفيفه إلى 1000 مل مع الميثانول. تصفية من خلال غشاء (0.22 ميكرو مترا، المرحلة العضوية) قبل الاستخدام.

3نتيجة التجربة

3.1 كروماتوجرام قياسي

تم تحديد محتوى إيثيل مالتول في غضون 7 دقائق ، مع شكل ذروة جيد واستجابة المركب ، بما يلبي متطلبات التحليل التجريبي.

الشكل 1 إيثيل مالتول كروماتوجرام (250ng/mL)

3.2 النطاق الخطي

تم تحضير المنحنى القياسي عن طريق التخفيف المتسلسل للمحلول القياسي لـ إيثيل مالتول. وكان النطاق الخطي 12.5 500ng / mL ،مع الانحرافات بين نتائج الكشف الخطية والتركيزات المعروفة أقل من الحد الأقصى للمعايير المسموح بهاجميع قيم R2 تجاوزت 09999، مما يشير إلى خطية ممتازة.

الجدول 3 نطاق خطية جدول المركبات

الشكل 2 نتائج خطية للمركبات

3.3 LOD و LOQ

في هذه الطريقة، نسبة الإشارة إلى الضوضاء (S/N) من إيثيل مالتول عند 12.5ng/mL أكبر بكثير من 10. عندما يتم تعريف S/N = 10 كحد نظري للكمية (LOQ) ،و S/N = 3 يتم تعريفها على أنها الحد النظري للكشف (LOD)الحد المحسوب للكشف (LOD) هو 1.07ng / mL ، والحد الحد للكمية (LOQ) هو 3.56ng / mL.

الجدول 4 LOQ و LOQ للمركبات

مركب	نسبة الإشارة إلى الضوضاء (S/N)	حدود الكشف (ng/mL)	حدود الكمية (ng/mL)
إيثيل مالتول	35.079	1.07	3.56

الشكل 3 كروماتوجرام المركبات LOQ

3.4 الدقة

أخذ العينات البيضاء من المذيب والسلبية إلى محلول إيثيل مالتول القياسي لإعداد تركيز نهائي قدره 25ng/mL، وإدخالها متتالية لمدة 7 مرات لتقييم الدقة.يتم عرض النتائج في الجدول أدناهكان RSD من إيثيل مالتول في حدود 3٪ ، مما يفي بمتطلبات الدقة القياسية ≤15٪.

الجدول 5 الدقة في المركبات

مركب	العينة	RSD
إيثيل مالتول	الميثانول المضاف	2.407%
	زيت فول الصويا	2.915%

الشكل 4 كروماتوجرام دقيق للعينة المضافة للميثانول

الشكل 5 كروماتوجرام دقيق لعينة زيت فول الصويا

3.5 معدل الاسترداد

تم تخفيف محلول 100 ميكروغرام/ميل من إيثيل مالتول مع زيت فول الصويا إلى 25 نانغ/ميل. بعد معالجة العينة مسبقاً، واستخراجها، وتصفيتها،تم إجراء سبعة حقن متتالية لمقارنة معدلات الشفاءويتم عرض النتائج في الجدول أدناه. وكان معدل الاسترداد من إيثيل مالتول 102.53٪، مما يصل إلى نطاق الاسترداد المقبول من 80٪ إلى 120٪.

الجدول 6 معدل استرداد المركبات

مركب	التركيز المتزايد (ng/mL)	الاسترداد (%)
إيثيل مالتول	25	102.53%

3.6 بقايا فارغة

بعد حقن أعلى نقطة (500 ng / mL) من المنحنى القياسي ، تم حقن مفاعل فارغ. لم يتم الكشف عن نقل فارغ بعد الحساب.

الشكل 6 كروماتوجرام بقايا فارغة

3.7 اختبار العينات

بعد المعالجة المسبقة، تم حقن عينة من نوع معين من زيت فول الصويا ولم يتم الكشف عن أي مركب مستهدف.

الشكل 7 كروماتوجرام اختبار العينة

4الاستنتاج

تستخدم هذه الطريقة نظام LCMS-TQ9200 للكروماتوجرافي السائل-موازي طيف الكتلة في Wayeal® لتحديد إيثيل مالتول في زيت فول الصويا.تظهر البيانات أن قمم الكروماتوجرافية للطريقة تظهر شكل قمم جيد دون وجود رذاذ، والحساسية تلبي المتطلبات. معامل الارتباط الخطي هي كل أكبر من 0.9999، الدقة هي ضمن 3٪ ومعدلات استعادة الذروة تتراوح بين 100٪ و 105٪. لم يتم ملاحظة أي نقل النظام للعينات عالية التركيز. تظهر هذه النتائج أن الطريقة،مجهزة بنظام Wayeal® LC-MS/MS، تلبي متطلبات الكشف النوعي والكمي الروتينية للمحلل المستهدف في العينات.

TQ9200 نظام الكروماتوجرافي السائل - طيف الكتلة (LC-MS/MS)

LC3400 عالية التكرارية الحقن Hplc جهاز الكروماتوغرافيا السائلة 75MPa

42MPa نظام HPLC عالية الضغط في صناعة الأدوية